Entwicklung einer real-time RT-PCR zum Nachweis von equinem Influenzavirus

Aeschbacher, Susanne; Santschi, Elisabeth; Gerber, Vinzenz; Stalder, Hanspeter; Zanoni, Reto Giacomo (2015). Entwicklung einer real-time RT-PCR zum Nachweis von equinem Influenzavirus. Schweizer Archiv für Tierheilkunde, 157(4), pp. 191-201. Huber 10.17236/sat00015

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Equine Influenza ist eine durch Influenza A-Viren verursachte, kontagiöse Respirationserkrankung beim Pferd. In dieser Arbeit wurde eine real-time RT-PCR in einem konservierten Abschnitt des Matrix-Segments des viralen Genoms für die schnelle und sensitive Diagnose von equinen Influenzaviren (EIV) und je eine RT-PCR Methode im Matrix- und im HA-Segment für die molekular-epidemiologische Charakterisierung der Viren entwickelt. Die Primer der real-time RT-PCR sind zu 99.4% der bekannten EIV-Sequenzen und zu 97.7% aller Influenza A-Sequenzen homolog. Die Homologie der Minor Groove Binder (MGB)-Sonde lag bei 99.3% und 99.6%. Diese hohen Werte ermöglichen die Anwendung des Assays für Influenzaviren bei anderen Spezies. Die diagnostische Eignung der Methode wurde mit Hilfe von 20 equinen, 11 porcinen sowie 2 aviären Proben verifiziert. Eine hohe Spezifität für Influenzaviren wurde experimentell und mittels Software-Simulation gezeigt. Die analytische Sensitivität des Tests lag bei 102–103 RNA-Kopien und 100–101 DNA-Kopien, was den Virusnachweis auch bei geringer Virusausscheidung ermöglicht. Alle amplifizierten EIV-Sequenzen konnten phylogenetisch den bekannten Linien zugeordnet werden.

Item Type:

Journal Article (Original Article)

Division/Institute:

05 Veterinary Medicine > Research Foci > Host-Pathogen Interaction
05 Veterinary Medicine > Department of Clinical Veterinary Medicine (DKV) > Equine Clinic
05 Veterinary Medicine > Department of Clinical Veterinary Medicine (DKV)
05 Veterinary Medicine > Department of Infectious Diseases and Pathobiology (DIP) > Institute of Virology and Immunology
05 Veterinary Medicine > Department of Infectious Diseases and Pathobiology (DIP)

UniBE Contributor:

Aeschbacher, Susanne; Santschi, Elisabeth; Gerber, Vinzenz; Stalder, Hanspeter and Zanoni, Reto Giacomo

Subjects:

600 Technology > 630 Agriculture

ISSN:

0036-7281

Publisher:

Huber

Language:

German

Submitter:

Andrea Gassmann-Suter

Date Deposited:

06 Nov 2015 09:26

Last Modified:

09 Sep 2017 05:55

Publisher DOI:

10.17236/sat00015

Uncontrolled Keywords:

equines Influenzavirus, real-time RT-PCR, MGB-Sonde, molekulare Epidemiologie, Diagnostik

BORIS DOI:

10.7892/boris.72560

URI:

https://boris.unibe.ch/id/eprint/72560

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